Virusli infektsiyalar keltirib chiqaradigan kasalliklar uchun davolash qilinadigan viruslarning turlarini aniqlash uchun quyidagi ikki turdagi tekshiruvlar o'tkazilishi mumkin:
1. Virusning o'zini bevosita aniqlash
2. Virus yuzasida antigen va virusning nuklein kislotasini aniqlay oladi.
Sinov virusga qarshi turish uchun ishlab chiqarilgan antikorlarni aniqladi:
Oddiy sharoitlarda antijen testi yuqori laboratoriya sharoitlarini talab qilmaydi va asosan birlamchi shifoxonalarda keng ko'lamli skrining uchun javob beradi; antikorlarni tekshirish oson ishlaydi va test natijalarini 10-15 daqiqada olish mumkin. Nuklein kislotani aniqlash uchun ko'plab laboratoriya sharoitlari, intervalgacha xodimlar va uskunalar talab qilinadi, ammo natija sahifasi eng sezgir va aniqdir.
Tasdiqlangan 10 ta yangi koronavirus nuklein kislotasini aniqlash reagentlaridan 8 tasi lyuminestsent PCR usulidan foydalanadi, qolgan aniqlash usullari esa kombinatsiyalangan zond-ankorli polimerizatsiya sekvensiyasi usuli va doimiy haroratni kuchaytirish chip usuli hisoblanadi.
1. Floresan PCR usuli
PCR usuli polimeraza zanjiri reaktsiyasiga ishora qiladi, bu DNKning iz miqdorini sezilarli darajada oshirishi mumkin. Yangi koronavirusni aniqlash uchun foydalanilganda, yangi koronavirus RNK virusi bo'lganligi sababli, PCRni aniqlashdan oldin virusli RNKni DNKga teskari transkripsiya qilish kerak.
Floresan PCRni aniqlash printsipi shundan iboratki, PCR davom etar ekan, reaktsiya mahsulotlari to'planishda davom etadi va floresan signalining intensivligi ham mutanosib ravishda ortadi. Nihoyat, mahsulot miqdorining o'zgarishi floresan intensivligining o'zgarishi bilan kuzatiladi va shu bilan floresan kuchaytirish egri chizig'ini oladi.
Hozirda bu yangi koronavirusni nuklein kislotani aniqlashda eng ko'p qo'llaniladigan usul. Biroq, quyidagi omillar test natijalarida xatolarga olib kelishi mumkin:
Noto'g'ri saqlash yoki sinovga topshirmaslik: RNK viruslari osongina parchalanadi. Shuning uchun, bemor namunalarini olgandan so'ng, ular standartlashtirilgan tarzda saqlanishi va imkon qadar tezroq sinovdan o'tkazilishi kerak. Aks holda, test natijasi noto'g'ri bo'lishi mumkin.
Natijalarni xato talqin qilish: Hozirda tasdiqlangan sinov mahsulotlari ochiq o'qish ramkasi 1a/b, konvert oqsili va yangi koronavirus genomining nukleokapsid oqsili asosida tanlanadi. Shu bilan birga, turli xil mahsulotlarning aniqlash primerlari va prob dizaynlari boshqacha bo'lib, bitta maqsadli segmentlarni, ikki maqsadli segmentlarni va uchta maqsadli segmentlarni aniqlash va talqin qilishda farqlar mavjud. Shuning uchun, agar talqin turli ko'rsatmalarga muvofiq qat'iy bajarilmasa, natijani noto'g'ri baholashga olib kelishi mumkin.
2. Kombinatsiyalangan prob-ankorli polimerizatsiya sekvensiyasi usuli
Bu aniqlash, asosan, ketma-ketlik slaydda DNK nanosferalari tomonidan olib boriladigan gen ketma-ketligini aniqlash uchun maxsus asbobdan foydalanishdan iborat.
Ushbu turdagi aniqlash yuqori sezuvchanlikka ega va tashxisni o'tkazib yuborish oson emas, lekin natijalarga ko'plab omillar ham oson ta'sir qiladi, jumladan:
Namunalar o'z vaqtida sinovdan o'tkazilmagan: lyuminestsent PCR usuli kabi, agar ular standartlashtirilgan tarzda saqlanmasa va imkon qadar tezroq sinovdan o'tkazilmasa, natijalar noto'g'ri bo'lishi mumkin.
Sinov maydonining xona harorati juda yuqori: Bu ham sinov natijalarining aniqligiga ta'sir qiladi. Turli xil sinov asboblari va to'plamlari ham natijalarga ta'sir qilishi mumkin.
3. Doimiy haroratni kuchaytirish chip usuli
Gen chiplarini aniqlash an'anaviy virusologik diagnostika usullaridan biridir. Aniqlash printsipi - nuklein kislotalarning bir-birini to'ldiruvchi bog'lanish xususiyatlariga asoslangan holda ishlab chiqilgan aniqlash usuli bo'lib, u organizmlarda mavjud bo'lgan nuklein kislotalarni sifat yoki miqdoriy jihatdan o'lchash uchun ishlatilishi mumkin. PCR bilan solishtirganda, gen chipi yuqori aniqlik darajasi va qisqaroq vaqtga ega, lekin u ham qimmatroq va aniqlash o'tkazuvchanligi (vaqt birligida ishlab chiqarilishi mumkin bo'lgan ma'lumotlar miqdori) nisbatan past.
Bu safar tasdiqlangan termostat chipi respirator viruslarning olti turini, shu jumladan yangi koronavirusni ham aniqlay oladi. Natijalarni 1,5 soat ichida olish mumkin,
PCR bilan solishtirganda, gen chipi yuqori aniqlik darajasi va qisqaroq vaqtga ega, ammo narxi qimmatroq va aniqlash o'tkazuvchanligi (vaqt birligida ishlab chiqarilishi mumkin bo'lgan ma'lumotlar miqdori) nisbatan past.
4. Virusga qarshi antikorlarni aniqlash
Antikorlarni aniqlash reagentlari virus inson tanasiga kirgandan keyin inson tanasi tomonidan ishlab chiqarilgan IgM yoki IgG antikorlarini aniqlash uchun ishlatiladi. IgM antikorlari avvalroq, IgG antikorlari esa keyinroq paydo bo'ladi.
Hozirgi vaqtda tasdiqlangan beshta yangi koronavirus antikorlarini aniqlash reagentlari kolloid oltin usuli va magnit zarrachalar kimilyuminesans usulidan foydalanadi.
5. Kolloid oltin usuli
Kolloid oltin usuli sinov uchun kolloid oltin sinov qog'ozidan foydalanadi, bu hozirda tez-tez tilga olinadigan tezkor sinov qog'ozidir.
Ushbu turdagi test qog'ozi maxsus belgilangan va uning ustida teshiklari bor, u imtihon oluvchining sarum namunasini tomizish uchun ishlatiladi. Kolloid oltin sinov qog'ozida ikkita chiziq mavjud, biri sinov chizig'i, ikkinchisi esa sifat nazorati chizig'i deb ataladi. Ikkala chiziq ham rangli bo'lsa, bu ijobiy degan ma'noni anglatadi; faqat sifat nazorati chizig'i rangli, bu salbiy degan ma'noni anglatadi; bu ikki holatdan tashqari, u Invalid natijaga tegishli.